流式细胞术的步骤-小知识

话题：流式细胞术的步骤?

回答：流式细胞仪的 作和使用 ①打开电源,对系统进行预热; ②打开气体阈,调节 压力, 适宜的液流速度;开启光源冷却系统; ③在样品管中加入去离子水,冲洗液流的喷嘴系统; ④利用校准标准样品,调整仪器,使在激光功率、光电倍增管电压、放大器电路增益调定的基础上,0和0散 的荧光强度最强,并要求变异系数为最小; ⑤选定流速、测量细胞数、测量参数等,在同样的 条件下测量样品和对照样品;同时选择计算机屏上数据的显示方式,从而能直观掌握测量进程; ⑥样品测量完毕后,再用去离子水冲洗液流系统; ⑦因为实验数据已存入计算机硬盘(有的机器还备有光盘系统,存贮量更大),因此可关闭气

话题：求:流式细胞术荧光指数的计算问题,麻烦大家了,一定会增

问题详情：看了细胞技术讨论版中很多关于流式细胞术的知识,但是还没有找

回答：其实我觉得用平均荧光强度就好了,国外文献上用这个的也很多。因为“正常人该蛋白表达的平均荧光强度”是个很理想化的数值,做过流式就知道,机器、抗体、以及机器的设置对平均荧光强度都有影响,这是流式标准化的一个问题。看攒涣假秸猹纪兼系 卤你的实验,样品和对照样品都有,它们之间来做显著性比较也是 的。但你有收集“正常人该蛋白表达的平均荧光强度”吗?如果你自己做了该数值,那么“样品蛋白表达的平均荧光强度”其实是平均荧光强度的平均值。其它数值也是这样处理

话题：流式细胞仪怎么用?

问题详情：还有每个荧光抗体所标记的细胞之类的,请问可否帮忙具体讲解一

回答：流式细胞仪的结构 流式细胞仪是进行流式细胞分析的仪器,集电子、计算机、激光、流体理论于一体,被誉为试验室的“CT”。 流式细胞术(Flow CytoMeter, FCM)是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段,它可 分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,与传统荧光镜 相比,具有速度快、精度高、准确性好等优点,成为当 最先进的细胞定量分析技术。 原理 将待测细胞染色后制成单细胞悬液。用一定压力将待测样品压入流动室,不含细胞的磷酸缓冲液在 下从鞘液管喷出,鞘液管入口方向与待测样品流成一定角度,这样,鞘液就能够包绕着样品 流动,组成一个圆形

话题：细胞试验中流式细胞术是用来干什么的,怎么用?

回答：流式的用处很多。原理就是激光-荧光。细胞用荧光染色(可以是 细胞或者活细胞,染料可以是荧光 谢活性的或者是标记的抗体)。然后依次快速通过机器的激光检测器。不同的机器装配有不同的激光,可多达4种。每秒可处理数千至数万的细胞。比较荧光强度,可以得到抗原表达的多少,DNA量多少,细胞的 谢水平。还可以根据这些信号来分拣细胞,进行下一步的试验。一般中心实验室的机器有专人 作,需要培训才能开机的。PBS配方:(1升) - .00 g of NaCl - 0.20 g of KCl - 1.44 g of Na2HPO4 - 0.24 g of KH2PO4 - Dissolve in 00 ml of distilled H2O - Adjust the pH to .4 with HCl or NaOH - Add distilled H2O to 1 liter.

参考回答：流式细胞术可以用来测细胞 期,测凋亡率和抗原情况。细胞经胰酶消化后用冰乙醇固定过夜,第二天用PI染料反应30分钟后就可以上

话题：免疫磁珠分离技术与流式细胞技术分离细胞用的表面标志是否

回答：表面抗原的选取不受用哪种分离技术的 。分离纯度方面,我只用过Miltenyi Biotech的免疫磁珠,从外 血单核细胞中提取CD4或CD细胞可以达到5-%左右纯度。流式分离的纯度我毫无概念,但是据我了解流式分离有两大缺点,一是对 作人员的技术和经验要求高,我见到的一个几十 实验室只有一两个人可以 作流式进行细胞分离,而磁珠的实验步骤每个人都能够很快地学会。二是细胞经受流体剪切力后,存活力很受影响。

参考回答：免疫磁珠效果更好,免疫磁珠具有流式细胞术不具备的特点。免疫磁珠主要利用的是磁分离的技术,比较精准一些,主要是磁珠这种超

话题：以 与细胞为中心了解其最新的发展成果及其应用

问题详情：急用 越详细越好

回答：1.流式细胞术的发展历史和 原理。对该技术与荧光编码微球技术相结合而发展起来的高通量细胞和生化分析技术及其最新发展作了评述。流式细胞术是一种对流动液体中排成单列的细胞逐个进行检测的技术,通过检测得到相应细胞的光散 和荧光信号,进而测定细胞的大小、形状、DNA、RNA、表面受体、酶活性、膜通透性和钙流量等,在 和爱滋病 、新 开发、干细胞和基因治疗、遗传学、家畜性别选择、农作物 种开发等方面都有广泛应用。采用顺序进样技术,则可不必加压而实现少量样品的自动分析和作亚秒水平 相互作用的 学测量。将该技术与近年发展起来的荧光染料编码微球技术相结合,则成为一种可以与

话题：液闪仪和流式细胞仪有什么 别?

回答：液体闪烁计数器 液体闪烁计数器[1](liquid scintillation counter)是使用液体闪烁体(闪烁液)接受 线并转换成荧光光子的放 性计量仪。 1. 仪器原理 液体闪烁计数器主要测定发生β核衰变的放 性核素,尤其对低能β更为有效。其基本原理是依据 线与物质相互作用产生荧光效应。首先是闪烁溶剂 吸收 线能量成为激发态,再回到基态时将能量传递给闪烁体 ,闪烁体 由激发态回到基态时,发出荧光光子。荧光光子被光电倍增管(PM)接收转换为光电子,再经倍增,在PM阳极上收集到好多光电子,以脉冲信号形式输送出去。将信号符合、放大、分析、显示,表示出样品液中放 性强弱与大小。 2. 主要功能 液体闪烁计数

话题：流式细胞仪的

问题详情：我们实验室想要购买一套流式细胞仪 50万左右 各位哪位用过

回答： 名称 流式细胞仪 英文名称 Flow Cytometer 国产/进口 进口 产地/品 美国贝克曼库尔特有限 型号 EPICS? ALTRA? 参考报价 商 贝克曼库尔特 有限 流式细胞仪 性能参数 EPICS? ALTRA? Flow Cytometer with HyPerSort Cell SortingDATA ManagementFlowCentreTM流式 中心与建于Windows 的EXPOTM32软件系统相配合,建立了强大的、多任务 作的 环境,这一 环境可用于数据采集、分析以及结果报告。A CHOICE OF Sorters小型、经济的空冷激光允 分选速度提高到10,000个/秒,为大多数应用领域提供了充足的空间,如果您的购买能力允 ,或者 需要,HyPerSort 系统将在更高分

参考回答： 名称: c6流式细胞仪 型号: C6 状态: 正常 品 : 产地: 美国 报价: 0 浏览次数: 316 特点 1、双激光激发:4nm激光

话题：单克隆抗体与基因克隆技术相结合

问题详情：单克隆抗体与基因克隆技术相结合,为分离和鉴定新的蛋白质和基

回答：汗……楼上写得太复杂了……单克隆抗体原理:用特定的淋巴免疫B细胞产生某种需要的特定抗体,抗体会和待鉴定的抗原发生基因工程中鉴定专用的“抗原-抗体结合”技术,就可以准确分离和鉴定出相应的蛋白质。简单的单克隆抗 备过程:1 向目标生物体中注 相应的抗原并获取相应的抗体和免疫B淋巴细胞。2 用动物细胞融合技术将目的淋巴B细胞和骨髓瘤细胞融合,产生新的 瘤细胞。3 使用特定方法分理处需要的骨髓瘤细胞(就是特定B细胞和骨髓瘤的 瘤细胞)。基因克隆技术:就是通称的体外细胞 PCR技术。使用基因工成分里获取的目的基因在PCR 仪中 。当然也可以用自动序列分析仪分析之后人工编码

参考回答：材料和方法1.1 材料1.1.1 细胞及菌株 HAb1为分泌抗人肝癌mAb的鼠 瘤细胞株,由 志南建株〔4〕;正常肝细胞株QZG引自

话题：血小板试验

问题详情：越详细越好.最好能说明一下试验分类和最新的应用情况.小弟在这

回答：一:血细胞分离机制备的浓缩血小板与洗涤血小板的体外实验对照 目的 对比 体外采集洗涤对血小板功能与形态的影响。方法 采用血细胞分析仪、经典玻球法、经典比浊法及流式细胞技术检测CS 30 0 0 plus血细胞分离机制备的单个供者浓缩血小板和洗涤血小板 ,采集前后及相互间血小板的有关形态学指标、粘附聚集性、血小板活化依赖性颗粒外膜蛋白 (GMP 14 0 )及血小板膜GPⅡb/Ⅲa复合物的表达。结果 两组 的血小板PDW、PCT、MPV均比采集前显著降低 ,但组间比较差异无显著性意义 ;两组血小板的粘附聚集率、CD62p+ 及CD41a+ CD62p+ 阳性表达率采集前后及组间比较 ,差异均无显著性意义。两组 的血小板