溶菌酶的缓冲液怎么配-小知识

话题：溶菌酶的缓冲液 怎么配

回答：就用天根细菌基因组DNA提取试剂盒中自带的TE缓冲液即可

话题：细菌蛋白质怎样提取?

回答：细菌蛋白很好提取的,关键是你要什么蛋白。一种方式是配置破菌缓冲液,成分是磷酸缓冲液加溶菌酶,根据情况加入DTT,EDTA等,然后用超声破碎或机械破碎方法提取。如果你要提取的蛋白带有纯化 ,那么可以利用这个 得到你要的目的蛋白。

话题：细菌蛋白质提取方法

回答：细菌蛋白很好提取的,关键是你要什么蛋白。一种方式是配置破菌缓冲液,成分是磷酸缓冲液加溶菌酶,根据情况加入DTT,EDTA等,然后用超声破碎或机械破碎方法提取。如果你要提取的蛋白带有纯化 ,那么可以利用这个 得到你要的目的蛋白。

参考回答：若为胞内可溶性蛋白,需使用破胞法(如超声裂解),使内容物释放,然后采用柱层析等步骤提取;若为胞内包涵体,细胞破碎后,离

话题：溶菌酶溶液怎么 配置,用于细胞的裂解

回答：0.1g溶菌酶溶解到10ml 10mmol/L Tris?Cl(pH.0),分装成1ml/小份,保存于-20℃

话题：蛋白的表达与纯化

回答：蛋白表达纯化已经是非常经典简单的实验了,没有LSS说的那么吓人。说说我的蛋白表达纯化以及下面的单抗 总体设计概要吧:1 首先要知道你要纯化蛋白的编码DNA序列,查阅相关文献,看目的基因在那些细胞或者 中高表达,进而设计该基因的引物,扩增出目的DNA片段的ARF。这一布叫目的基因片段的获取2 构建表达载体:根据你 的基因本身的特性确定原核或者真核载体中表达,这一步的主要问题就是构建带有目的基因的质粒,导入表达系统中。一般原核表达时间短,成本低,表达量大,常优先考虑;但是有些基因在E coli中就是表达不出,可能是 子优化等出现问题,也或者是由于想纯化得到更好的活性蛋白的

参考回答：恭喜你选择了一个超级难的 课题。有的人究其一生都没有完成某种蛋白的表达和纯化。祝你成功。建议到图书馆找找相关的书来看

话题：蛋白质提取分离纯化鉴定的实验方

回答：一.血清ǐ-球蛋白的初步提取1. 血细胞与血清分离: 取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm离心20min .弃沉淀,留上清备用(沉淀为血细胞,上部为血清).2. 乳糜粒分离:4000rpm 10°C离心10分钟,采用密度梯度离心梯度液 配置:离心管下部3/4容积加血浆,上部1/4容积加0.5MnaCl+0.3MEDTA,PH.4 乳糜粒上浮,将乳糜粒吸出,留其余液体备用。 3. 血清蛋白分离:除去球蛋白,白蛋白及其它蛋白质。 5000rpm 10°C离心1h,密度梯度离心梯度.液 配置:管容量1/3为血清,2/3为1。31g/ml,NaCl+NaBr,搅拌后终密度为1。21g/ml .管上部1/6容积为血清脂蛋白,下部5/6为其它蛋白。4.取2ml下部5/6血清于小试管中,加0.%氯化钠溶液2.0ml

话题：细菌原生质融合的 !急求!

问题详情：急求关于这方面的 ,最好是又培养基的配置和试验条件!谢谢

回答：一、目的要求了解原生质体融合技术的原理。学 并掌握以细菌为材料的原生质体融合技术。二、基本原理原核微生物基因重组主要可通过转化、转导、接合等途径,但有些微生物不适于采用这些途径,从而使育种 受到一定的 。1 年第三届 工业微生物遗传学讨论会上,有人提出微生物细胞原生质体融合这一新的基因重组手段。由于它具有 多特殊优点,所以,目前已为国内外微生物育种 所广泛 和应用。(一) 原生质体融合的优点(1) 克服种属间 的“不育性”,可以进行远缘 。由于用酶 去细胞壁,因此,即使相同接合型的真菌或不同种属间的微生物,皆可发生原生质体融合,产生重组子。(2) 基因重

话题：通过实验,缓冲溶液有哪些性质?缓冲溶液的pH值由哪些因

回答：缓冲溶液有哪些性质?当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有 溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液。在缓冲溶液中加入少量强酸、强碱或加水稀释,其溶液pH值变化不大,缓冲溶液的pH值由哪些因素决定?首先 度可以影响缓冲溶液的PH值。在一定的 度下,缓冲溶液的 式是☆一元弱酸和弱酸盐缓冲溶液的通式:PH=PK-lgc酸/c盐☆弱碱和弱碱盐组成的缓冲溶液的通式:PH=14-PKb+lgc碱/c盐从缓冲溶液的通式我们可知,缓冲溶液的PH值与电离常数及共轭酸碱对之间的浓度比有关。

参考回答：缓冲液大多数是化学盐,可以逐渐水解释放酸或碱。

话题：考马斯亮蓝G与考马斯亮蓝G

回答：将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50m1 5%乙醇,加入100ml浓磷酸,然后,用蒸馏水补充至200ml,此染液放4℃至少6个月保持稳定。———————————————————————————————————————考马斯亮蓝:化学性质考马斯亮蓝有G250和R250两种。 考马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色,最大光吸收在4nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在55nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比。 考马斯亮蓝R250与蛋白质反应虽然比较缓慢,但是可以被洗脱下去,所以可以用来对电泳条带染色。考马斯蓝染色coomassie blue staining 又称Bradford法,由于其突出的优点,正得到

参考回答：2.蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合的反应十分迅速,在2min左右反应达到平衡;先将考马斯亮蓝配制成母液(低 下可长期放置),工

话题：如何利用透析法进行脱盐浓缩蛋白?

问题详情：现在想要脱盐处理,不知道如何配置脱盐用的透析液,有什么样的

回答：二、蛋白质的分离纯化 蛋白质的分离纯化方法很多,主要有: (一)根据蛋白质溶解度不同的分离方法 1、蛋白质的盐析 中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响,一般在低盐浓度下随着盐浓度升高,蛋白质的溶解度增加,此称盐溶;当盐浓度继续升高时,蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出,这种现象称盐析,将大量盐加到蛋白质溶液中,高浓度的盐离子(如硫酸铵的SO4和NH4)有很强的水化力,可夺取蛋白质 的水化层,使之“失水”,于是蛋白质胶粒凝结并沉淀析出。盐析时若溶液pH在蛋白质等电点则效果更好。由于各种蛋白质 颗粒大小、亲水程度不同,故盐析所需的盐浓度也不一样,因此调节混合蛋白质溶液中的中性