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提个建议吧
在这里很难详细达到你的要求
可以去CNKI或万方去搜索你要测定的蛋白质,然后输入仪器型号.当然检索项最好是摘要.
我当时做实验的时候都是采用的这种方法.
不同的蛋白也会稍有不同.
如果你不方便下载全文或查询,你可以告诉我你要做的蛋白或酶,我给你查询.
另外如果你还是不想查的话
可以去生物谷里面有很多实验高手.
当然还是建议自己去查下,既然做这个实验应该至少是硕士吧.
其他回答
http://www.bbioo.com/bio101/2006/6822.htm
这里介绍的非常详细,就是没法贴出来,自己看吧
其他类似问题
问题1:测定蛋白质等电点的方法的原理是什么[生物科目]
等电聚焦电泳(IFE,isoelectric focusing electrophoresis)
利用特殊的一种缓冲液(两性电解质)在凝胶(常用聚丙烯酰胺凝胶)内制造一个pH梯度,电泳时每种蛋白质就将迁移到等于其等电点(pI)的pH处(此时此蛋白质不再带有净的正或负电荷),形成一个很窄的区带.
还有一种是根据蛋白在等电点时的溶解度来测定,配制一系列不同pH的缓冲液,测定蛋白质的溶解度,溶解度最小的pH就是蛋白的pI.
问题2:蛋白质的等电点是多少?[生物科目]
不同的蛋白质等电点式不同的
常见蛋白质等电点参考值
蛋白质 等电点
鲑精蛋白[salmine] 12.1
鲱精蛋白[clupeine] 12.1
鲟精蛋白[sturline] 11.71
胸腺组蛋白[thymohistone] 10.8
珠蛋白(人)[globin(human)] 7.5
卵白蛋白[ovalbuin] 4.71;4.59
伴清蛋白[conal bumin] 6.8,7.1
血清白蛋白[serum albumin] 4.7-4.9
肌清蛋白[myoal bumin] 3.5
肌浆蛋白[myogen A] 6.3
β-乳球蛋白[β-lactoglobulin] 5.1-5.3
卵黄蛋白[livetin] 4.8-5.0
γ1—球蛋白(人)[γ1-globulin(human)] 5.8,6.6,7.3,8.2
γ2—球蛋白(人)[γ2-globulin(human)] 5.2-5.5
肌球蛋白A[myosin A] 5.1
原肌球蛋白[myosin A] 5.9
铁传递蛋白[siderophilin] 3.4-3.5
胎球蛋白[fetuin] 5.5-5.8
血纤蛋白原[fibrinogen] 4.8
α-眼晶体蛋白[α-crystallin] 6.0
β-眼晶体蛋白[β-crystallin] 5.1
花生球蛋白[arachin] 3.9
伴花生球蛋白[conarrachin] 3.7-5.0
角蛋白类[keratins] 4.6-4.7
还原角蛋白[keratein] 6.5-6.8
胶原蛋白[collagen] 4.8-5.2
鱼胶[ichthyocol] 4.7-5.0
白明胶[gelatin] 4.0-4.1
α-酷蛋白[α-casein] 4.5
β-酷蛋白[β-casein] 5.8-6.0
γ-酷蛋白[γ-casein] 3.83-4.41
α-卵清粘蛋白[α-ovomucoid] 1.8-2.7
α1-粘蛋白[α1-mucoprotein] 5.5
卵黄类粘蛋白[vitellomucoid] 3.2-3.3
尿促性腺激素[urinary gonadotropin] 11.0-11.2
溶菌酶[lyso zyme] 6.99
肌红蛋白[myoglobin] 7.07
血红蛋白(人)[hemoglobin(human)] 7.23
血红蛋白(鸡)[hemoglobin(hen)] 6.92
血红蛋白(马)[hemoglobin(horse)] 4.6-6.4
血蓝蛋白[hemerythrin] 5.6
蚯蚓血红蛋白[chlorocruorin] 4.3-4.5
血绿蛋白[chlorocruorin] 4.6-6.2
无脊椎血红蛋白[erythrocruorins] 9.8-10.1
细胞色素C[cytochrome C] 4.47-4.57
视紫质[rhodopsin] 5.2
促凝血酶原激酶[thromboplastin] 5.5
α1-脂蛋白[α1-lipoprotein] 5.4
β1-脂蛋白[β1-lipoprotein] 5.9
β-卵黄脂磷蛋白[β-lipovitellin] 3.75
芜菁黄花病毒[turnip yellow vvirus] 5.3
牛痘病毒[vaccinia virus] 6.85
生长激素[somatotropin] 5.73
催乳激素[prolactin] 5.35
胰岛素[insulin] 1.0
胃蛋白酶[pepsin] 8.1
糜蛋白酶(胰凝乳蛋白酶[chymotrypsin] 4.9
牛血清白蛋白[bovine serum albumin] 7.8
核糖核酸酶(牛胰)[ribonuclease或Rnase(bovine pancreas)]4.58
甲状腺球蛋白[thyroglobulin] 4
问题3:还可以用什么方法测蛋白质的等电点[化学科目]
●方法:平板等电聚焦
●原理:蛋白质分子在含有载体两性电介质形成的连续而稳定的线性pH梯度中进行电泳.但不自是按照等电点不同被分离.
●仪器:Bio-Rad Model 111Mini IEF Cell
●样品要求:
●液体:浓度>3mg/ml;体积>200ul;固体:质量>200ug
●样品纯度>90%;含盐量
问题4:蛋白质等电点和氨基酸等电点的关系?[生物科目]
两者之间没有直接的关系.
氨基酸的等电点由α-NH3+、α-COOH及R基上的易解离基团决定,当一个氨基酸只存在α-NH3+、α-COOH,pI为这两个基团pKa值的平均值.存在3个可解离基团时,pI为2个同属性基团pKa值的平均值,如酸性氨基酸的pI就等于α-COOH及R基上-COOH pKa值的平均值.由于α-COO- 受到α-NH2的影响比较稳定(也就是α-COOH容易给出H+),反过来,α-NH2则不容易接受H+,所以大部分的氨基酸等电点偏酸.
蛋白质的等电点由N端的-NH3+、C端的-COOH及R基上的易解离基团决定.这是因为其他氨基酸的α-NH2、α-COOH都参与了肽键的组成从而失去了酸碱性(接受或给出质子的能力).但在计算蛋白质等电点时,应考虑R基基团被包埋在空间结构内部的可能.而C端的-COO-也因为临近肽键的影响比较稳定,所以大部分的蛋白质等电点也偏酸.
但蛋白质等电点和氨基酸等电点之间没有直接的联系.
问题5:什么事蛋白质的等电点?[化学科目]
使蛋白质解离成正、负离子的趋势相等,即成为兼性离子,净电荷为零时溶液的pH称为蛋白质的等电点.
蛋白质溶液的pH大于等电点时,该蛋白质颗粒带负电荷,反之则带正电荷.
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