超声法破碎细胞提蛋白质的具体步骤听说用超声破碎的...

优质解答

1、清洗后的的组织用搅切机切碎成小块,混悬在至少两倍体积的缓冲液内；洗去培养液的细胞,混悬在至少两倍体积的缓冲液中；

2、将超声探头没入混悬液内,进行超声破碎.一般总超声时间约2min,分为几个周期,如4×30s,周期之间让样品在冰浴中冷却.

总的过程就是这样,不用加裂解液.

其他回答

请问楼主，可否将得到的最佳答案分享一下，在下也很需要了解。

其他类似问题

问题1：请问我超声破碎细胞时怎么有泡沫出现?怎么解决呢?谢谢各位大侠!我在做用超声破碎仪破碎细胞的试验,但好几次破碎时都出现了泡沫,而且泡沫极不容易消除,恳请各位大侠帮忙!谢谢!

探头位置没放好:探头一定要接近底部,约1cm.功率根据仪器不同会有所不同,但你可以观察液面,有波动但不要太剧烈就好.

超声破碎的条件不能一概而论,要看你的实验要求,有的是细菌破碎,有的是对组织细胞进行破碎,要掌握好功率和每次超声时间,功率大时,每次超声时间可缩短,不能让温度升高,必要时在冰浴条件下进行超声破碎.至于每次超声时是否起泡沫到不是关键的问题,这与你超声的量明显有关.

问题2：超声波破碎细胞会不会让蛋白断裂

一定会,当细胞破坏了,实质是蛋白破坏

问题3：在超声破碎提取粗酶液时,破碎液除了蛋白质还有什么?[生物科目]

超声波破碎的是细胞,那么破碎液中除了你加入的破碎buffer之外有的就是从细胞中释放出来的物质：如核酸,你要提取的酶,其他杂蛋白,多糖,细胞膜碎片等等.

问题4：实验室没有超声波破碎细胞怎么办

使用反复冻融,反复冻融和超声波破碎细胞一样的能破裂细胞壁

问题5：关于大肠杆菌中重组蛋白抽提的具体步骤?[生物科目]

一步法细菌活性蛋白提取试剂盒

产品编号：BSP023

产品简介:

一步法细菌活性蛋白提取试剂采用一种温和的可以通过透析去除的,破裂细菌细胞,溶解蛋白,而不会产生变性的非离子型去污试剂从大肠杆菌中提取可溶性蛋白,不需要超声等机械细胞破碎方法,该试剂可以从细菌裂解液中提取可溶性蛋白和回收包涵体蛋白,而且提取效率要高于超声等机械细胞破碎方法,该试剂盒提供Lysozyme和DNase I可以提高分子量大于60kDa可溶性蛋白和蛋白包涵体洗涤沉淀回收效率,提取的可以溶性蛋白可以直接用于电泳,免疫共沉淀,蛋白质交链,标记,Pull Down ,EMSA,酶免分析 (Western blot,ELISA,RIA)等实验.由提取试剂,Lysozyme,Dnase,PMSF,DTT组成,可以使用20次.

产品特点:

1.\x05可以在20分钟内完成对细菌可溶性蛋白的提取.

2.\x05该试剂可以同时实现可溶性蛋白提取和蛋白包涵体洗涤,沉淀和回收.

3.\x05提取的可以溶性蛋白可以直接用于电泳,免疫共沉淀,蛋白质交链,标记,Pull Down ,EMSA等实验.

4.\x05提取的蛋白质可以透析去除离子和去污试剂,或将缓冲液替换为所需要的目的蛋白质的合适缓冲液.

5.\x05可以按照需要按比例扩大提取的菌体的量,比较合适于重组蛋白的快速筛选.