基因工程原理题求答1、当一DNA片段插入pUC18后，在x-g...

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1、α－互补和插入失活

在LacZ—的大肠杆菌中，在有IPTG诱导物和X-gal生色底物的平板培养中，菌落是白色的。若在该细胞中引入pUC质粒，其上有LacZ′，质粒和大肠杆菌DNA可实现α－互补， 表达出β-半乳糖苷酶，可降解生色底物使菌落呈蓝色。

如果在质粒的多克隆位点的某个酶切点上克隆了外源基因，则LacZ′基因受到破坏，便不能再和缺陷型受体菌中生成有活性的β-半乳糖苷酶，因此菌落呈白色。

实验设计自己设计吧。

2、酶谱的原理是：限制性内切酶在DNA上有特异的识别和切割位点，可将DNA切开而得到两个或两个以上的大小不同的片段，这些片段可通过电泳分离并检测其大小。双酶切法酶切图谱构建是使用两种不同的限制性内切酶对同一个DNA分子进行单酶切和双酶切，将所得的片段进行对比组装，对交替区域进行加减以确定酶切位点的相对位置。

所以选择的各限制酶识别顺序载体则分散于整个DNA分子中。

3、要求是在酶切酶联是不能移码这一原则。而且在选择酶切位点具有唯一性。否则会把载体切成很多段。

有一个软件可以用，你把你的序列输进去，他就会显示酶切位点和酶，然后你自己选择。软件是 DNAssist2.2

人工查找很麻烦。

你自己去下载自己找吧（或者叫学长帮你找出来，自己分析）。我没有软件。我也在忙考试。

4、同第二题。